ПЦР-тест — основной способ обнаружения коронавирусной инфекции. Полимеразная цепная реакция — что же все-таки это такое, какие еще заболевания выявляет, в чем достоинства и недочеты анализа и что значат его результаты — в мателе .
Анализ ПЦРПолимеразная цепная реакция (ПЦР) — это способ молекулярно-генетической диагностики, позволяющий найти в человеческом организме разные инфекционные заболевания.
В его базе лежит многократное повышение малых концентраций фрагментов РНК и ДНК.
Полимеразная цепная реакция была изобретена в 1983 году южноамериканским биохимиком Кэри Муллисом.
Он желал достигнуть того, чтоб можно было сделать множество копий ДНК за счет фермента ДНК-полимеразы, который участвует в ее репликации.
За это Муллис получил Нобелевскую премию по химии.
Понятно, что еще сначала 1970-х годов схожий способ был представлен иным ученым, но задумку так не смогли воплотить.
Позднее анализ был существенно усовершенствован и обширно употребляется в био, биохимической и мед практике.
Как работает ПЦРДля проведения анализа нужно сложное, современное оборудование.
"Применяется особый устройство, он именуется амплификатор, в который помещается частичка вируса либо еще что-нибудь, содержащее РНК либо ДНК, — поведал кандидат мед наук, клинический фармаколог Андрей Кондрахин.
— Дело в том, что РНК и ДНК довольно мелкие, чтоб их найти, и осознать есть ли в человеческом теле вредные мельчайшие организмы, потому делают ПЦР-тест.
В огромную машинку кладут частицу вируса, но она его не распознает, потом добавляются особые составляющие, праймеры, которые разрешают сделать огромное количество этих цепочек РНК.
Их становится настолько не мало, что машинка начинает их "созидать".
Даже ежели есть хоть самая малая РНК вируса, к примеру, коронавируса, это дозволяет сделать множество копий инфекции, что помогает найти находится она в организме либо нет.
Способ дает итог фактически стопроцентной точности.
Для определения COVID-19 есть отдельный праймер.
Там находится огромное число нуклеотидов, из которых строится будущая РНК.
Она поначалу разрушается, а позже поновой выстраивается.
Реакция именуется цепной, так как чрезвычайно быстро это происходит.
Как копий становится много, сходу начинается считывание".
Применение ПЦРПЦР-тест обнаруживает наличие возбудителей вирусных болезней, когда иными способами этого сделать нельзя.
К примеру, иммунологическими, бактериологическими и микроскопическими исследованиями.
Также значительную роль играет фактор времени, так как анализ делается достаточно быстро по сопоставлению с иными.
"Способ применяется не только лишь для вирусов, да и частичек ДНК, также микробов, — объяснил спец.
— К примеру, мы можем найти, к какому виду амеба относится, к примеру, к грамотрицательным либо грамположительным".
Полимеразную цепную реакцию используют в криминалистике, когда необходимо сделать анализ ДНК с места преступления, его позже ассоциируют с генетическим мателом подозреваемого.
Также употребляется для установления отцовства либо материнства, нахождения в человеческом организме вирусов и микробов, выявления аллергии на некие лекарства либо их токсичности.
Проведение ПЦРДля анализа требуется ДНК - либо РНК-матрицы, участки которых необходимо скопировать, два праймера с необходимыми ферментами, термостабильная ДНК-полимераза, также некие остальные составляющие.
Способ ПЦР выявляет всякую ДНК либо РНК живого либо мертвого возбудителя.
Для их определения употребляют особенные праймеры, в каких содержатся вырожденные позиции РНК либо ДНК.
Подготовка мателаЭтот шаг очень важен для проведения анализа ПЦР, так как большая часть ошибок, до 70% случаев, совершается конкретно во время пробоподготовки, что влияет на конечный итог анализа.
Чтоб этого избежать, необходимо верно забрать мател для тестирования и приготовить его.
Потому во почти всех лабораториях при заборе крови употребляются вакуумные системы, которые меньше травмируют человека не допускают того, чтоб мател для анализа контактировал с окружающей средой либо персоналом.
Какие био мателы исследуютсяВ исследовании традиционно употребляются разные биомателы:Достоинства и недочеты методаПЦР различается от остальных исследований тем, что может найти несколько различных возбудителей сразу.
Для него необходимо сдать лишь один анализ, никаких доп тестов не требуется.
"Преимуществом способа будет то, что можно найти возбудителя в малом количестве, просто в мизерном, — объяснил клинический фармаколог.
— Благодаря этому можно скорее поставить диагноз, так как мы знаем, какой конкретно мельчайший организм начинает развиваться.
В тесте пишется концентрация выявленных у ДНК и РНК микроорганизмов, ежели берется мазок из носа либо ротовой полости, также к какому классу они принадлежат.
Другими словами находится точное осознание, к какому типу относится возбудитель и каково его количество.
Не достаточно, много, или его вообщем нет в организме.
" По словам Андрея Кондрахина, к одному из минусов теста относятся трудности при заборе матела:"Самый 1-ый недочет способа — нужна абсолютная чистота в помещении, поближе к стерильности, так как попадание даже мелких инородных объектов может отдать неверный итог из-за того, что чувствительность аппарата чрезвычайно высочайшая.
Сходу начнется повышение концентрации этих частиц, которое машинка может прочесть.
2-ое — чтоб пошла реакция, необходимы особые мателы, праймеры. Для каждой реакции есть свои праймеры — куски, из которых будут создаваться новейшие РНК. Тест небыстрый — по времени может занимать около суток. Не считая этого, нужен обученный, высокопрофессиональный персонал. Сами аппараты достаточно массивные, хотя на данный момент уже есть и установки наименьшего размера. Но чем больше машинка, тем больше она может прочесть. Это система не для мобильного использования". Загрязнение матела для теста может произойти также, ежели при его транспортировке были допущены ошибки, из-за непригодности реагентов, попадании в их крови, клеток эпителия, огромного количества слизи. Разновидности ПЦРПЦР-тест бывает пары видов:Не считая этого, есть асимметричная ПЦР и групп-специфическая ПЦР. "Существует методика проведения ПЦР в настоящем времени, — поведал Андрей Кондрахин. — Это самый стремительный анализ, как говорится, тут и на данный момент. Его делают с помощью устройства, в каком есть картридж, определяющий лишь одну заразу, к примеру, коронавирус. Не считая него аппарат ничего не лицезреет, как и при обыкновенном ПЦР, но в таком случае итог можно получить намного скорее". Какие инфекции дозволяет выявитьПолимеразная цепная реакция дозволяет найти у человека инфекционные заболевания, к примеру:Также тестирование помогает выявить наследственную расположенность человека к неким болезням и оценить гормональный фон. ПЦР-тест на COVID-19Для ПЦР-теста на коронавирус у человека берется мазок из носа и ротоглотки. Во время пандемии его советуют сдать всем, кто хворает ОРВИ, гриппом, пневмонией и т. д. Берут мател для анализа амбулаторно, также спец может выехать на дом. Согласно требованиям, пациента выписывают опосля 2-ух отрицательных тестов на наличие инфекции. ПЦР-тесты могут давать ложноположительный либо ложноотрицательный итог, в таком случае нужно повторное исследование. Как приготовиться к сдаче анализа"Специальной подготовки вообщем не требуется, разве что не принимать еду за три часа (минимум) перед забором матела, ежели будут брать мазок из ротовой полости. Частицы пищи могут извратить итог. Довольно прополоскать рот с водой и идти на анализ", — объяснил спец. Перед мазком также не рекомендуется пить кофе, чай, другие напитки, чистить зубы, полоскать рот освежающими смесями, жевать жевательную резинку, курить. Нос нельзя промывать, закапывать туда капли либо мазать лекарствами. Ежели берут кровь, то ее нужно сдавать натощак, чтоб итог был очень четким. Мочу следует собирать в утреннее время суток натощак либо через 2-3 часа опосля приема еды. Лучше сделать это сходу опосля сна. Расшифровка анализа ПЦРПосле проведения теста результаты оцениваются и аппаратурой, и специалистами-медиками. "В конце теста машинка докладывает, что она отыскала в мазке, а врач-лаборант обрисовывает итог, — объяснил эксперт. — Ежели в програмку машинки заложена информация о том, при каких количествах считается тест положительным, означает, это будет делать автомат. В анализе будет или да, или нет. Самому человеку ничего расшифровывать не надо, единственное, что спец может поглядеть за машинкой — это количество кусочков РНК, так как бывают ложноположительные либо ложноотрицательные результаты, ежели в аппарате произошел сбой. Все равно контроль со стороны доктора находится. " Как точна ПЦР-диагностика зараз"ПЦР полностью точна, фактически 99,9%, так как аппарат выстроит полностью такую же РНК, как слепок с ключа, один в один. Там ничего новейшего сделать нельзя. Набор частичек возрастает до того количества, которое может распознать машинка. Сделать это можно, даже ежели частиц чрезвычайно не достаточно", — отметил Андрей Кондрахин. При всем этом из-за того, что часто встречаются ошибки при взятии био матела и существует возможность попадания инородных частичек, могут возникать ложноположительные либо ложноотрицательные результаты тестирования на коронавирус.